Gram plet: hvordan den er lavet, og hvad den er beregnet til

Indhold

• Hvordan Gram pletten gøres
• Hvad er det for

Gram-plet eller simpelthen Gram er en hurtig og enkel teknik, der sigter mod at differentiere bakterier i henhold til egenskaberne ved deres cellevæg efter eksponering for forskellige farvestoffer og opløsninger.

Ved hjælp af Gram-farvning er det således muligt ud over bakteriens form at kontrollere den farve, de får, og dette resultat er vigtigt for at definere andre strategier til identifikation af bakteriearten og for lægen at indikere forebyggende behandling i henhold til de mikroskopisk observerede egenskaber.

Gramfarvning udføres normalt rutinemæssigt i laboratoriet og er en del af bakterioskopiundersøgelsen. Forstå, hvad bakterioskopi er, og hvordan det gøres.

Hvordan Gram pletten gøres

Gram-plet er en hurtig, praktisk og billig metode til at identificere bakterier, der er ansvarlige for infektioner, hvilket er nyttigt for læger til at indikere en forebyggende behandling af infektionen, der kan forekomme, da specifikke karakteristika for disse grupper af bakterier er kendt.

Gramfarvning udføres i 7 hovedtrin, men protokollen kan variere afhængigt af laboratoriet:

1. Placer nogle kolonier af bakterien på objektglasset, tilsæt en dråbe vand for at lette homogenisering af kolonierne;
2. Lad det tørre lidt, og bladet kan passere hurtigt gennem flammen for at favorisere tørring, men det er vigtigt at være opmærksom på temperaturen, da hvis temperaturen er for høj, er det muligt, at der er en ændring i strukturen på bakterier, som kan forstyrre resultatet af undersøgelsen;
3. Når objektglasset er tørt, skal du dække med det violette krystalfarvestof og lade det virke i ca. 1 minut.
4. Vask diaset med en strøm af rindende vand og dæk objektglasset med lugol, som har til formål at fastgøre det blå farvestof, og lad det virke i 1 minut. Begge typer bakterier kan absorbere det kompleks, der dannes af farvestoffet og lugolen, og blive blå;
5. Vask derefter diaset med rindende vand, og påfør 95% alkohol, lad det virke i 30 sekunder. Alkohol er ansvarlig for opløsning af lipidmembranen, der danner gramnegative bakterier, og dermed fjernelse af det dannede kompleks mellem farvestoffet og lugolen og misfarvning af disse bakterier. I tilfælde af grampositive bakterier dehydrerer alkohol imidlertid cellevæggen af ​​grampositive bakterier, hvilket får porerne til at trække sig sammen og gøre dem uigennemtrængelige;
6. Vask derefter i rindende vand igen og dæk objektglasset med det andet farvestof, fuchsin eller safranin, og lad det virke i 30 sekunder;
7. Vask derefter objektglasset under rindende vand og lad det tørre ved stuetemperatur.

Så snart objektglasset er tørt, er det muligt at lægge en dråbe nedsænkningsolie og observere objektglasset under mikroskopet med et 100x mål, idet det er muligt at kontrollere tilstedeværelsen eller fraværet af bakterier samt tilstedeværelsen af ​​gær og epitel celler.

Hvad er det for

Gramfarvning har det primære mål at differentiere bakterier i henhold til cellevæggens egenskaber og generelle morfologi. I henhold til de kendetegn, der observeres under mikroskopet, kan bakterier klassificeres i:

• Grampositive bakterier, som visualiseres med en blå farve på grund af det faktum, at de ikke misfarves af alkohol, da de har en tykkere cellevæg, og deres porer trænger sammen, når de udsættes for lugol;
• Gram-negative bakterier, som visualiseres med en lyserød / lilla farve, fordi de misfarves af alkohol og farves af safranin eller fuchsin.

Efter at have set bakterierne under mikroskopet er det muligt, at der udføres yderligere test i laboratoriet for at identificere bakterierne. Gennem Gram og tilknytning til tegn og symptomer, der præsenteres af personen, kan lægen dog indikere en forebyggende behandling, indtil resultatet af mere specifikke undersøgelser er tilgængeligt, da det på denne måde er muligt at nedsætte bakteriereplikationshastigheden og forhindre komplikationer.