Elektroforese: hvad det er, hvad det er til, og hvordan det gøres

Indhold

• Hvad er det for
• Hvordan det gøres
• Typer af elektroforese
• 1. Hæmoglobinelektroforese
• 2. Proteinelektroforese

Elektroforese er en laboratorieteknik, der udføres med det formål at adskille molekyler i henhold til deres størrelse og elektriske ladning, så diagnosticering af sygdomme kan foretages, proteinekspression kan verificeres eller mikroorganismer kan identificeres.

Elektroforese er en enkel og billig procedure, der bruges i laboratorierutine og i forskningsprojekter. I henhold til formålet med elektroforese kan det være nødvendigt at udføre andre tests og undersøgelser for at nå frem til en diagnose, for eksempel.

Hvad er det for

Elektroforese kan udføres til forskellige formål, både i forskningsprojekter og til diagnose, da det er en simpel og billig teknik.Således kan elektroforese udføres for at:

• Identificer vira, svampe, bakterier og parasitter, idet denne applikation er mere almindelig i forskningsprojekter;
• Faderskabstest;
• Kontroller ekspressionen af ​​proteiner;
• Identificere mutationer, der f.eks. Er nyttige til diagnosen leukæmi;
• Analyser typerne af cirkulerende hæmoglobin, idet de er nyttige til diagnosticering af seglcelleanæmi;
• Vurder mængden af ​​proteiner, der er til stede i blodet.

I henhold til formålet med elektroforese kan det være nødvendigt at udføre andre supplerende tests for at lægen kan afslutte diagnosen.

Hvordan det gøres

For at udføre elektroforese kræves gelen, som kan være polyacrylamid eller agarose afhængigt af formålet, elektroforesebuffer og kar, molekylvægtmarkør og et fluorescerende farvestof ud over et UV- eller LED-lysudstyr, også kendt som en transilluminator.

Efter klargøring af gelen skal et bestemt objekt placeres, så brøndene fremstilles i gelen, populært kaldet kammen, og lad gelen sætte sig. Når gelen er klar, skal du bare anvende stofferne i brøndene. Til dette skal der placeres en molekylvægtmarkør i en af ​​brøndene, en positiv kontrol, som er det stof, der vides, hvad det er, en negativ kontrol, der garanterer gyldigheden af ​​reaktionen, og de prøver, der skal analyseres. Alle prøver skal blandes med et fluorescerende farvestof, da det på denne måde er muligt at visualisere båndene på transilluminatoren.

Gelen med prøverne skal placeres i elektroforesekaret, som indeholder den specifikke bufferopløsning, og derefter tændes enheden, så der er elektrisk strøm og følgelig potentialforskel, som er vigtig for separationspartiklerne i henhold til deres belastning og størrelse. Den elektroforetiske køretid varierer alt efter procedurens mål og kan vare op til 1 time.

Efter den specificerede tid er det muligt at se resultatet af det elektroforetiske løb gennem transilluminatoren. Når gelen placeres under UV- eller LED-lys, er det muligt at visualisere båndmønsteret: jo større molekylet er, desto mindre vandrer det, når det kommer tættere på brønden, mens jo lettere molekylet er, desto større er migrationspotentialet.

For at reaktionen skal valideres, skal båndene til den positive kontrol visualiseres, og intet skal visualiseres i den negative kontrol, da det ellers er en indikation af, at der var forurening, og hele processen skal gentages.

Typer af elektroforese

Elektroforese kan udføres til forskellige formål, og i henhold til dets formål kan der anvendes flere typer gel, hvor den mest almindelige er polyacrylamid og agarose.

Elektroforese til identifikation af mikroorganismer er mere almindelig at blive udført i forskningslaboratorier, men til diagnostiske formål kan elektroforese bruges til at identificere hæmatologiske sygdomme og sygdomme, der udvikler sig med stigningen i mængden af ​​proteiner, der er de vigtigste typer elektroforese:

1. Hæmoglobinelektroforese

Hæmoglobinelektroforese er en laboratorieteknik, der udføres for at identificere de forskellige typer hæmoglobin, der cirkulerer i blodet, hvilket gør det muligt at identificere tilstedeværelsen af ​​sygdomme relateret til hæmoglobinsyntese. Hæmoglobintypen identificeres ved hjælp af elektroforese ved en bestemt pH, ideelt mellem 8,0 og 9,0, med et båndmønster, der kan sammenlignes med det normale mønster, hvilket muliggør identifikation af unormale hæmoglobiner.

Hvad det er lavet til: Hæmoglobinelektroforese udføres for at undersøge og diagnosticere sygdomme relateret til hæmoglobinsyntese, såsom seglcelleanæmi og hæmoglobin C-sygdom, udover at være nyttige til at differentiere thalassæmi. Lær hvordan man fortolker hæmoglobinelektroforese.

2. Proteinelektroforese

Proteinelektroforese er en undersøgelse, som lægen anmoder om at vurdere mængden af ​​proteiner, der cirkulerer i blodet og dermed identificere sygdomme. Denne undersøgelse udføres fra en blodprøve, der centrifugeres for at opnå plasmaet, hvor den del af blodet blandt andet består af proteiner.

Efter elektroforese kan et mønster af bånd visualiseres og derefter en graf, hvor mængden af ​​hver fraktion af proteiner er angivet, hvilket er grundlæggende for diagnosen.

Hvad det er lavet til: Proteinelektroforese gør det muligt for lægen at undersøge forekomsten af ​​multipelt myelom, dehydrering, skrumpelever, betændelse, leversygdom, pancreatitis, lupus og hypertension i henhold til båndmønsteret og grafen præsenteret i undersøgelsesrapporten.

Forstå hvordan det gøres, og hvordan man kan forstå resultatet af proteinelektroforese.